皮質(zhì)醇檢測(cè)試劑盒操作方法及原理

[背景]：皮質(zhì)醇，是糖皮質(zhì)激素中的一種類(lèi)固醇激素。在人類(lèi)中，它由腎上腺中的腎上腺皮質(zhì)束狀帶產(chǎn)生，在壓力和低血糖時(shí)釋放，可作為壓力的一個(gè)生物標(biāo)志物。皮質(zhì)醇的產(chǎn)量與ACTH依賴(lài)的晝夜節(jié)律相關(guān)，在早晨達(dá)到峰值，隨后逐漸降低。皮質(zhì)醇在很多基質(zhì)中可被檢測(cè)到，如血液、糞便、尿液和唾液。血清中90-95%的皮質(zhì)醇與蛋白結(jié)合，包括皮質(zhì)類(lèi)固醇結(jié)合球蛋白和血清白蛋白。皮質(zhì)醇主要參與代謝和免疫。在代謝方面，它可促進(jìn)糖異生、肝糖原沉積和降低葡萄糖利用率。在免疫方面，作為重要的抗炎因子，在過(guò)敏、免疫抑制和疾病抵抗中發(fā)揮重要作用。異常的皮質(zhì)醇水平與許多狀況有關(guān)，包括前列腺癌、抑郁癥和精神分裂癥。身體組織中皮質(zhì)醇過(guò)高是庫(kù)欣綜合征的誘因。
[檢測(cè)原理]：本試劑盒采用固相競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。兔抗小鼠多克隆抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。皮質(zhì)醇特異性的單克隆抗體加入至孔中，經(jīng)過(guò)孵育，與固相抗體結(jié)合。洗滌后，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的皮質(zhì)醇和未標(biāo)記的皮質(zhì)醇或樣本，競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合單克隆抗體上有限的結(jié)合位點(diǎn)。在洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入顯色底物，顏色反應(yīng)的深淺與皮質(zhì)醇的濃度成反比。加入終止液終止反應(yīng)，在 450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng) 570 - 630 nm)測(cè)定吸光度值。                                                           樣本類(lèi)型]：血清、血漿、細(xì)胞上清、組織等相關(guān)生物樣本。                                                              [規(guī)格型式]：96孔板、48孔板，可拆卸                                                                                              [保存條件]：試劑盒未拆開(kāi)，2-8℃保存。已拆開(kāi)，標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存，其它2-8℃℃保存。                   [有效期]：6個(gè)月。

敏感性/Z低檢測(cè)濃度計(jì)算方式：敏感性等于20個(gè)空白對(duì)照孔的平均O.D.值加上2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差后對(duì)應(yīng)的濃度。樣品的O.D.讀數(shù)只有在高過(guò)敏感性指標(biāo)的時(shí)候才具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。                                           [變異系數(shù)]：板內(nèi)變異系數(shù)<10%,板間變異系數(shù)<15%。                                                                    [回收率]：三組已知的高、中、低濃度樣品，進(jìn)行五次回收率評(píng)估，回收率在85%-115%之間。
[需用戶自己提供的實(shí)驗(yàn)器材和試劑]：                                                                                              1. 96孔讀板儀器。
2. 自動(dòng)洗板機(jī).
3. 移液器和槍頭。建議使用多通道移液器/排槍。
4. Eppendorf 管。